Cómo citar
Restrepo, J., Ortiz, L., Cardona, X., & Olivera, M. (2012). Evaluación de la sensibilidad y especificidad del diagnóstico molecular del Staphylococcus aureus en leche de vacas afectadas por mastitis. Biosalud, 11(2), 40–51. Recuperado a partir de https://revistasojs.ucaldas.edu.co/index.php/biosalud/article/view/4712

Autores/as

Juan Restrepo
Universidad de Antioquia. Colanta Ltda.
juanrb@colanta.com.co
Luisa Ortiz
Universidad de Antioquia
luifernanda@gmail.com
Ximena Cardona
Colanta Ltda.
ximenacl@colanta.com.co
Martha Olivera
Universidad de Antioquia
syngamia@gmail.com

Resumen

Entre los agentes contagiosos que inducen mastitis severas en la vaca, se encuentra el Staphylococcus aureus (S. aureus), de difícil cura bacteriológica y alta resistencia antimicrobiana. Debido a que el cultivo microbiológico de las muestras clínicas, solo ofrece resultado en un 50% de los casos (1) el diagnóstico por PCR es una alternativa. El objetivo de este estudio fue probar si los cebadores descritos por Cremonesi et al. (2) para el diagnóstico de S. aureus, como de buena sensibilidad y especificidad, sirven para ser usados en muestras clínicas. Los resultados demostraron que las siguientes secuencias de nucleótidos como cebadores: F 5' AGC TGT GGA TTG TCC TTT GG 3' y R 5' TCG CTC GCT CAC CTT AGA A 3', para obtener un amplificado de 499 pb no sirven en muestras clínicas por su baja especificidad (62,95%). Se requiere buscar nuevos cebadores que amplifiquen regiones del S. aureus que no se compartan con otras bacterias, en especial aquellas que producen mastitis en vacas productoras de leche.

Koskinen M, Holopainen J, Pyörälä S, Bredbacka P, Pitkälä A, Barkema H, et al. Analytical specificity and sensitivity of a real-time polymerase chain reaction assay for identification of bovine mastitis pathogens. Journal of Dairy Science 2009; 92(3):952-959.

Cremonesi P, Castiglioni B, Malferrari G, Biunno I, Vimercati C, Moroni P, et al. Technical Note: Improved Method for Rapid DNA Extraction of Mastitis Pathogens Directly from Milk. Journal of Dairy Science 2006; 89(1):163-169.

Philpot WN. Relación entre el manejo del hato y la mastitis. http://www.cnmweb.bizland.com/publicaciones/DrPhilpot1. 2001, 3, 2003.

Calderón A, Rodríguez VC. Prevalencia de mastitis bovina y su etiología infecciosa en sistemas especializados en producción de leche en el altiplano cundiboyacence (Colombia). Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias 2008; 21(4):582-589.

Kim CH, Khan M, Morin D, Hurley W, Tripathy D, Kehrli Jr M, et al. Optimization of the PCR for detection of Staphylococcus aureus nuc gene in bovine milk. Journal of Dairy Science 2001; 84:74-83.

Philpot WN, Nickerson SC. Ganando la lucha contra la mastitis. Naperville, USA; 2001.

Keefe TM, Ceballos A, Jaramillo M, Londoño M, Chaffer M, Montoya M. Prevalencia del Streptococcus agalactiae en tanques de enfiamiento de la Cooperativa COLANTA. En: VII Seminario Internacional Competitividad Carne y Leche. COLANTA ed. Medellín Octubre 21, 22, 2010. Vol. 1, p. 53.

Russi NB, Bantar C, Calvinho LF. Antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus causing bovine mastitis in Argentine dairy herds. Revista Argentina de Microbiología 2008; 40(2):116-119.

San Martín B, Kruze J, Morales M, Agüero H, León B, Esppinoza S, et al. Resistencia bacteriana en cepas patógenas aisladas de mastitis en vacas lecheras de la V Región, Región Metropolitana y X Región, Chile. Archivos de Medicina Veterinaria 2002; 34:221-234.

Cucarella C, Solano C, Valle J, Amorena B, Lasa I, Penadés JR. Bap, a Staphylococcus aureus surface protein involved in biofilm formation. Journal of Bacteriology 2001; 183(9):2888-2896.

Melchior M, Vaarkamp H, Fink-Gremmels J. Biofilms: a role in recurrent mastitis infections? The Veterinary Journal 2006; 171(3):398-407.

Loeza-Angeles H., López-Meza JE, Ochoa A. Efecto del medio condicionado de células endoteliales que expresan el péptido antimicrobiano tionina Thi2.1 de Arabidopsis thaliana sobre aislamientos de Staphylococcus aureus. Revista Mexicana de Ciencias Farmacéuticas 2010; 41(2):36-41.

Sharma N, Pandey V, Sudhan, N. Comparison of some indirect screening tests for detection of subclinical mastitis in dairy cows. Bulgarian Journal of Veterinary Medicine 2010; 13(2):98-103.

National-Mastitis-Council. Current Concepts of Bovine Mastitis In: National Mastitis Council, Madison, WI 1998; Vol. 4a ed.

Rodríguez G. Comportamiento de la Mastitis Bovina y su impacto económico en algunos hatos de la Sabana de Bogotá, Colombia. Revista de Medicina Veterinaria 2006; 12:35-55.

Pinzón A, Moreno FC, Rodríguez, G. Efectos de la mastitis subclínica en algunos hatos de la cuenca lechera del Alto Chicamocha (departamento de Boyacá). Revista de Medicina Veterinaria 2009; 17:23-36.

Trujillo CM, Gallego AF, Ramírez N, Palacio Baena L.G. Prevalence of mastitis in dairy herds in Eastern Antioquia. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias 2011; 24:11-18.

Corpoica. Prevalencia de los principales microorganismos causantes de mastitis en vacas lecheras del Centro del Valle del Cauca en los años 2003 a 2006. 2007. Disponible en: http://www.monografias.com/trabajos59/microorganismos-mastitis-vacas-lecheras/microorganismos-mastitis-vacaslecheras3.shtml

Ramírez N, Gaviria G, Arroyave O, Sierra B, Benjumea J. Prevalencia de mastitis en vacas lecheras lactantes en el municipio de San Pedro de los Milagros, Antioquia. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias 2009; 14:76-87.

Calvinho LF, Tirante L. Prevalencia de microorganismos patógenos de mastitis bovina y evolución del estado de salud de la glándula mamaria en Argentina en los últimos 25 años. Rev. FAVE Sección Cs. Vet. 2005; 4:29-40.

Shim EH, Shanks RD, Morin DE. Milk loss and treatment costs associated with two treatment protocols for clinical mastitis in dairy cows. J Dairy Sci 2004; 87(8):2702-8.

Ferraro L, Scaramelli A, Troya H. Prevalencia de la mastitis subclínica bovina en Venezuela y evaluación de la prueba de mastitis de California (CMT) como prueba diagnóstica. Revista Científica FCV-LUZ 1999; IX(2):81-90.

Sabour P, Gill J, Lepp D, Pacan J, Ahmed R, Dingwell R, Leslie K. Molecular typing and distribution of Staphylococcus aureus isolates in Eastern Canadian dairy herds. Journal of Clinical Microbiology 2004; 42:3449-3455.

Sumathi B, Veeregowda B, Amitha RG. Prevalence and antibiogram profile of bacterial isolates from clinical bovine mastitis. Veterinary World 2008; 1(8):237-238.

OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals : Validation and quality control of Polymerase Chain Reaction methods used for the diagnosis of infectious diseases. OIE: Ginebra, Suiza. 2008 vol 1., chapter 1.1.5. 46- 55

Park YS, Lee SR, Kim YG. Detection of Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp., Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes in kimchi by multiplex polymerase chain reaction (mPCR). Journal Microbiol 2006; 44(1):92-97.

Aarestrup FM, Wegener H, Rosdahl V. Evaluation of phenotypic and genotypic methods for epidemiological typing of Staphylococcus aureus isolates from bovine mastitis in Denmark. Veterinary Microbiology 1995; 45(2-3):139-50.

Kuzma K, Malinowski E, Lassa H, Klossowska A. Detection of genes for enterotoxins and toxic shock syndrome toxin-1 in Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis. Bull. Vet. Inst. Pulawy 2003; 47:419-426.

Reinoso E, Betterra S, Odierno L, Bogni C. rep-PCR of Staphylococcus aureus strains isolated from bovine mastitis in Argentina. Vet. Res. Anim. Sci. 2007; 40:115-121.

Vieira-da-Motta O, Folly MM, Sakyiama CCH. Detection of different Staphylococcus aureus strains in bovine milk from subclinical mastitis using PCR and routine techniques. Brazilian Journal of Microbiology 2001; 32(1):27-31.

Yugueros J, Temprano A, Sánchez M, Luengo JM, Naharro G. Identification of Staphylococcus spp. by PCR-Restriction fragment length polymorphism of gap gene. Journal of Clinical Microbiology 2001; 39(10):3693-3695.

San Milln R, Garaizar J, Bikandi J. In silico simulation of fingerprinting techniques based on double endonuclease digestion of genomic DNA. In silico biology 2005; 5(3):341-6.

Poutou R, Burbano M, Sierra S, Torres K, Carrascal A, Mercado, M. Estandarización de la extracción de ADN y validación de la PCR múltiple para detectar Listeria monocytogenes en queso, leche, carne de res y pollo. Pontificia Universidad Javeriana: Revista de la Facultad de Ciencias 2005; 10(2):61-78.

Sindhu N, Sharma A, Kumar S, Jain V. Polymerase chain reaction assay for detection of Staphylococcus aureus in buffalo milk. Italian Journal of Animal Science 2007; 6(2):862-864.

Gandra Á, Silva A, Macedo R, Ribeiro M, Mata M, Silva W. Differentiation between Staphylococcus aureus, S. intermedius and S. hyicus using phenotypical tests and PCR. Alimentos e Nutrição Araraquara 2005; 16(2):99-103.

Abu AS, Radstrom P. Capacity of nine thermostable DNA polymerases to mediate DNA amplification in the presence of PCR-inhibiting samples. Applied and Environmental Microbiology 1998; 64:3748-3753.

Rainard P, Fromageau A, Cunha P, Gilbert FB. Staphylococcus aureus lipoteichoic acid triggers inflammation in the lactating bovine mammary gland. Veterinary Research 2008; 39(5):52.

Ercolini D, Blaiotta G, Fusco V, Coppola S. PCR-based detection of enterotoxigenic Staphylococcus aureus in the early stages of raw milk cheese making. Journal of Applied Microbiology 2004; 96(5):1090-1096.

Ramesh A, Padmapriya B, Chrashekar A, Varadaraj M. Application of a convenient DNA extraction method and multiplex PCR for the direct detection of Staphylococcus aureus and Yersinia enterocolitica in milk samples. Molecular and Cellular Probes 2002; 16:307-314.

Khan M, Kim C, Kakoma I, Morin E, Hansen R, Hurley W, Tripathy D, Baek, B. Detection of Staphylococcus aureus in milk by use of polymerase-chain-reaction analysis. American Journal of Veterinary Research 1998; 59(7):807-813.

Brakstad O, Aasbakk K, Maeland JA. Detection of Staphylococcus aureus by polymerase chain reaction amplification of the nuc gene. Journal of Clinical Microbiology 1992; 30(7):1654-1660.

Yang Y, Su X, Yuan Y, Kang C, Li Y, Zhang W, Zhong X. Detection of Staphylococcus aureus in Dairy Products by Polymerase Chain Reaction Assay. Agricultural Sciences in China 2007; 6(7):857-862.

Manfredi E, Leotta G, Rivas M. PCR múltiple para la detección de los genes sea, seb, sec, sed y see de Staphylococcus aureus. Caracterización de aislamientos de origen alimentario. Revista Argentina de Microbiología 2010; 42(3):212-215.

Castañeda Vázquez H, El Sayed A, Jager S, Joachim A, Lammler C, Woter W. Estudio comparativo de las características genotípicas de cepas de Staphylococcus aureus aisladas de casos de mastitis clínica y subclínica en México. Veterinaria México 2006; 37(2):165-179.

Granados Beltrán E. Caracterizacion de aislamientos de Staphylococcus aureus asociados a mastitis bovina en las localidades de Cotzio y Tajaro, mediante secuenciacion del gen de arn robosomal 16s. Universidad Michoacán de San Nicolás de Hidalgo, 2011. http://bibliotecavirtual.dgb.umich.mx:8083/jspui/bitstream/123456789/422/1/CARACT~2.PDF

Oliveira DC, de Lencastre H. Multiplex PCR strategy for rapid identification of structural types and variants of the mec element in methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2002; 46:2155-2161.

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.
Sistema OJS - Metabiblioteca |