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Jurado-Gámez, H. ., & Jarrín-Jarrín, V. . (2015). Cinética de crecimiento de Lactobacillus lactis y determinación del efecto probiótico en cepas patógenas. Biosalud, 14(2), 49–62. https://doi.org/10.17151/biosa.2015.14.2.5
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Resumen
Introducción: Las bacterias ácido-lácticas se han estudiado por su capacidad de crecer en ambientes difíciles y generar antagonismos con otros microorganismos. La presente investigación buscó determinar los parámetros de la cinética de crecimiento de Lactobacillus lactis y su efecto probiótico sobre Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Clostridium perfringens y Staphylococcus aureus. Materiales y Métodos: Se evaluó el crecimiento de la cepa láctica a concentraciones de 0,5, 1 y 2% de sales biliares; 1 y 1,5% de bilis; tres niveles de pH (2,5, 4,5 y 7) y dos de temperaturas (38 y 45°C). También se evalúo la susceptibilidad de todas las cepas a los antibióticos Dicloxacilina, Cefepime, Cefalotina, Ciprofloxacina, Pentamicina y Penicilina con la técnica de Kirby-Bauer. Se determinó la inhibición de L. lactis y su sobrenadante en E. coli, S. typhimurium, C. perfringens y S. aureus y se estimaron los parámetros de: crecimiento, pH, consumo de azúcar, acidez y consumo de proteína durante la cinética de fermentación en medio MRS. Se determinaron péptidos presentes en el sobrenadante de L. lactis mediante HPLC. Resultados: Se obtuvo un crecimiento de 1,2 x 109 y 4,1 x 109 ufc/ml a 1,2% de bilis y a 0,5% de sales biliares; 1,1 x 1011, 2,1 x 1010 y 1,0 x 1010 ufc/ml para pH 2,5, 4,5 y 7 respectivamente; y 1,7 x 1013 y 1,4 x 1013 ufc/ml para 45 y 38°C. La cepa láctica presentó resistencia a Dicloxacilina y Cefalotina; C. perfringens, a Dicloxacilina y Penicilina; S. typhimurium y E. coli, a Cefalotina; y S. aureus, a Dicloxacilina. L. lactis inhibió a E. coli y C. perfringens, y el sobrenadante incluyó a S. aureus. Conclusión: Se concluye que L. lactis presenta adecuados crecimientos en condiciones in vitro e inhibió a E. coli, C. perfringens y S. aureus pero no a S. typhimurium.
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1. Cueto-Vigil MC, Acuña-Monsalve Y, Valenzuela-Riaño J. Evaluación in vitro del potencial probiótico de bacterias ácido lácticas aisladas de suero costeño. Actual Biol 2010; 32(93):129-138.
2. Rajaram G, Manivasagan P, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Purification and characterization of a Bacteriocin produced by Lactobacillus lactis isolated from marine environment. Advance Journal of Food Science and Technology 2010; 2(2):138-144.
3. Mohankumar A, Murugalatha N. Characterization and Antibacterial Activity of Bactereocin Producing Lactobacillus Isolated from Raw Cattle Milk Sample. Intern. J. Biol. 2011; 3(3):128-143.
4. González-Olivares LG, Jiménez-Guzmán J, Cruz-Guerrero A, Rodríguez-Serrano G, Gómez-Ruiz L, García-Garibay M. Liberación de péptidos bioactivos por bacterias lácticas en leches fermentadas comerciales. Revista Mexicana de Ingeniería Química 2011; 10(2):179-188.
5. Marguet ER, Vallejo M, Sierralta-Chichisola V, Quispe JL. Actividad antagonista de bacterias lácticas aisladas del medio marino contra cepas de Listeria. Acta Bioquím. Clín. Latinoam. 2011; 45(2):305- 310.
6. Pérez M, Laurencio M, Rondón AJ, Milian G, Bocourt R, Arteaga F. Actividad antimicrobiana de una mezcla probiótica de exclusión competitiva y su estabilidad en el tiempo. Rev. Salud Anim. 2011; 33(3):147-153.
7. Karthikeyan V, Santosh SW. Isolation and parcial characterization of bacteriocin produced from Lactobacillus plantarum. Afr. J. Microbiol. Res. 2009; 3(5):233-239.
8. Dal Bello B, Cocolin L, Zeppa G, Field D, Cotter PD, Hill C. Technological characterization of bacteriocin producing Lactococucus lactis strains employed to control Listeria monocytogenes in Cottage cheese. Intern. J. Food Microbiol. 2012; 153:58-65.
9. Estrada A, Gutiérrez L, Montoya O. Evaluación in vitro del efecto bactericida de cepas nativas de Lactobacillus sp. contra Salmonella sp. y Escherichia coli. Rev. Fac. Nal. Agr. Medellín 2005; 58(1):2601-2609.
10. Cajarville C, Brambillasca S, Zunino P. Utilización de prebióticos en monogástricos: aspectos fisiológicos y productivos relacionados al uso de subproductos de agroindustrias y de pasturas en lechones. Revista Porcicultura Iberoamericana 2011; 1-11.
11. Sánchez L, Vichi J, Llanes M, Castro E, Soler DM, Espinosa I, Kociubinski GL, Ferreira CL. Aislamiento y caracterización in vitro de cepas de Lactobacillus ssp. como candidato a probióticas. Rev. Salud Anim. 2011; 33(3):154-160.
12. Mathur S, Singh R. Antibiotic resistance in food lactic acid bacteria – a review. Intern. J. Food Microbiol. 2005; 105(3):281-295.
13. Cabrera CE, Gómez RF, Zúñiga AE. La resistencia de bacterias a antibióticos, antisépticos y desinfectantes una manifestación de los mecanismos de supervivencia y adaptación. Colombia Médica 2007; 38(2):149-158.
14. Junod T, López-Martín J, Gädicke P. Estudio de susceptibilidad antimicrobiana de Salmonella enterica en muestras de origen animal y alimentario. Rev. Med. Chile. 2013; 141:298-304.
15. Rajaram G, Manivasagan P, Gunasekaran U, Ramesh S, Ashokkumar S, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Isolation, identification and characterization of bacteriocin from Lactobacillus lactis and its antimicrobial and cytotoxic properties. African Journal of Pharmacy and Pharmacology 2010; 4(12):895-902.
16. Dimov S, Ivanova P, Harizanova N. Genetics of bacteriocins biosynthesis by lactic acid bacteria. Biotechnology & Biotechnological Equipment 2005; 19(Supl 2):4-10.
17. Eggimann B, Bachmann M. Purification and Partial characterization of an aminopeptidase from Lactobacillus lactis. Applied and Environmental Microbiology 1980; 40(5):876-882.
18. Lade H, Chitannad M, Gyananath G, Kadam T. Studies On Some Properties of Bacteriocins Produced by Lactobacillus Species Isolated from Agro-Based Waste. The Intern. J. Microbiol. 2006; 2(1):1-4.
19. Crueger W, Crueger A. Biotecnología: Manual de Microbiología Industrial. 3 ed. España: Ed. Acribia; 1993.
20. Dahl T, Midden W, Hartman P. Killing of Gram-negative and Gram-positive Bacteria by Pure Singlet Oxygen. J Bacteriol 1989; 171(4):2188-2194.
21. Cai Y, Suyanandana P, Saman P, Benno Y. 1999. Classification and characterization of lactic acid bacteria isolated from the intestines of common carp and freshwater prawns. J Gen Appl Microbiol 1999; 45(4):177-184.
22. Bauer A, Kirby J, Sherris T. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am. J. Clin. Pathol. 1966; 36:493-496.
23. Tagg J, McGiven A. 1971. Assay system for Bacteriocins. Appl. Environ. Microb. 1971; 21(5):943.
24. Jurado-Gámez H, Calpa-Yama F, Chaspuengal-Tulcán A. Determinación in vitro de la acción probiótica de Lactobacillus plantarum sobre Yersinia pseudotuberculosis aislada de Cavia porcellus. Rev. Fac. Med. Vet. Zoot. 2014; 61(3):241-257.
25. Ramírez M. Actividad inhibitoria de cepas de bacterias acido lácticas frente a bacterias patógenas y deterioradoras de alimentos [tesis]. Pachuca de Soto, México: Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo; 2005.
26. LANARA, Laboratorio de Referencia Animal. Métodos analíticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus ingredientes. Ii- Métodos físico e químicos. Mel. Ministério da Agricultura. Brasilia. 1981; 2(25):1-15.
27. Dubois M, Gilles K, Hamilton J, Rebers P, Smith F. Colorimetric method for determination of sugar and related substances. Anal Chem 1956; 28:350-356.
28. Negri L. El pH y la acidez de la leche; 2005. Disponible en: http://www.aprocal.com.ar/wp-content/ uploads/pH-y-acidez-en-leche2.pdf [consultado 2 de diciembre de 2013].
29. Lowry O, Rosebroug N, Far A, Randall R. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951; 193:265-75.
30. Rodríguez-León JA, Bueno G, Rodríguez DE, Delgado G, Serrano P, Brizuela MA. True and apparent yields and maintenance coefficient and their significance on fermentation kinetics. En: S. Roussos et al. (Eds.). New Horizons Biotechnology. Kluwer Academic Publishers; 2003. p. 163-172.
31. SAS Institute Inc. SAS/STAT® 9.1 User’s Guide. Cary, NC: SAS Institute Inc.; 2004.
32. Kumar R, Grover S, Kumar-Batish V. Hypocholesterolaemic effect of dietary inclusion of two putative probiotic bile salt hydrolase-producing Lactobacillus plantarum strains in Sprague-Dawley rats. British Journal of Nutrition 2011; 105:561-573.
33. Hamon E, Horvatovich P, Izquierdo E, Bringel F, Marchioni E, Aoudé-Werner D, Ennahar S. Comparative proteomic analysis of Lactobacillus plantarum for the identification of key proteins in bile tolerance. BMC Microbiology 2011; 11:63.
34. Wu R, Sun Z, Wu J, Meng H, Zhang H. Effect of bile salts stress on protein synthesis of Lactobacillus casei Zhang revealed by 2 –dimensional gel electrophoresis. J. Dairy Sci. 2010; 93:3858-3868.
35. Adebayo-Tayo B, Onilude A. Screening of Lactic Acid Bacteria Strains Isotated from Some Nigerian Fermented Food for EPS production. World Applied Science Journal 2008; 4(5):741-747.
36. Teijón-Rivera JM, Garrido-Pertierra A, Blanco-Gaitán D, Villaverde-Gutiérrez C, Mendoza-Oltras C, Ramírez-Rodrigo J. Fundamentos de bioquímica metabólica. Segunda edición. Madrid: Editorial TÉBAR, S.L.; 2006.
37. Kandler O, Weiss N. Regular, Nosporing Gram-positive Rods. En: Sneath PH, Mair NS, Sharpe ME, Holt JG (Eds.). Bergey’s manual of systematic bacteriology. Vol. 2. Baltimore (USA): Williams & Wilkins; 1986. p. 1208-1235.
38. Piard J, Desmazeaud M. Inhibiting factors produced by lactic acid bacteria. Oxygen metabolites and catabolism end-products. Lait 1991; 71:525-541.
39. Broadbent J, Larsen R, Deibel V, Steele J. Physiological and Transcriptional Response of Lactobacillus casei ATCC 334 to Acid Stress. J. Bacteriol. 2010; 192(9):2445-2458.
40. Tambecar D, Buhutada S. Studies on Antimicrobial Activity and Characteristic of Bacteriocins produced by Lactobacillus Strains Isolated from Milk of Domestic Animals. The Internet Journal of Microbiology 2008; 8(2).
41. Sankar N, Priyanka D, Reddy P, Rajanikanth P, Kumar K, Indira M. Purification and Characterization of Bacteriocin Produced by Lactobacillus plantarum Isolated from Cow Milk. Inter. J. Microbiol. Res. 2012; 3(2):133-137.
42. Rajaram G, Manivasagan P, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Purification and Characterization of a Bacteriocin Produced by Lactobacillus lactis Isolated from Marine Environment. Advance Journal of Food Science and Technology 2010; 2(2):138-144.
43. Allende A, Martínez B, Selma V, Gil M, Suárez J, Rodríguez A. Growth and bacteriocin production by lactic acid bacteria in vegetable broth and their effectiveness at reducing Listeria monocytogenes in vitro and in fresh-cut lettuce. J. Food Mocrobiol. 2007; 1-8.
44. Qin J, Zhao B, Wang X, Wang X, Wang L, Yu B, et al. Non-Sterilized Fermentative Production of Polymer-Grade L-Lactic Acid by a Newly Isolated Thermophilic Strain Bacillus sp. 2-6. Plos One 2009; 4(2):e4359.
45. Batdorj B, Trinetta V, Dalgalarrondo M, Prévost H, Dousset X, Ivanova I, et al. Isolation, taxonomic identification and hydrogen peroxide production by Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis T31, isolated from Mongolian yoghurt: inhibitory activity on food-borne pathogens. J. Appl. Microbiol. 2007; 103:584-593.
2. Rajaram G, Manivasagan P, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Purification and characterization of a Bacteriocin produced by Lactobacillus lactis isolated from marine environment. Advance Journal of Food Science and Technology 2010; 2(2):138-144.
3. Mohankumar A, Murugalatha N. Characterization and Antibacterial Activity of Bactereocin Producing Lactobacillus Isolated from Raw Cattle Milk Sample. Intern. J. Biol. 2011; 3(3):128-143.
4. González-Olivares LG, Jiménez-Guzmán J, Cruz-Guerrero A, Rodríguez-Serrano G, Gómez-Ruiz L, García-Garibay M. Liberación de péptidos bioactivos por bacterias lácticas en leches fermentadas comerciales. Revista Mexicana de Ingeniería Química 2011; 10(2):179-188.
5. Marguet ER, Vallejo M, Sierralta-Chichisola V, Quispe JL. Actividad antagonista de bacterias lácticas aisladas del medio marino contra cepas de Listeria. Acta Bioquím. Clín. Latinoam. 2011; 45(2):305- 310.
6. Pérez M, Laurencio M, Rondón AJ, Milian G, Bocourt R, Arteaga F. Actividad antimicrobiana de una mezcla probiótica de exclusión competitiva y su estabilidad en el tiempo. Rev. Salud Anim. 2011; 33(3):147-153.
7. Karthikeyan V, Santosh SW. Isolation and parcial characterization of bacteriocin produced from Lactobacillus plantarum. Afr. J. Microbiol. Res. 2009; 3(5):233-239.
8. Dal Bello B, Cocolin L, Zeppa G, Field D, Cotter PD, Hill C. Technological characterization of bacteriocin producing Lactococucus lactis strains employed to control Listeria monocytogenes in Cottage cheese. Intern. J. Food Microbiol. 2012; 153:58-65.
9. Estrada A, Gutiérrez L, Montoya O. Evaluación in vitro del efecto bactericida de cepas nativas de Lactobacillus sp. contra Salmonella sp. y Escherichia coli. Rev. Fac. Nal. Agr. Medellín 2005; 58(1):2601-2609.
10. Cajarville C, Brambillasca S, Zunino P. Utilización de prebióticos en monogástricos: aspectos fisiológicos y productivos relacionados al uso de subproductos de agroindustrias y de pasturas en lechones. Revista Porcicultura Iberoamericana 2011; 1-11.
11. Sánchez L, Vichi J, Llanes M, Castro E, Soler DM, Espinosa I, Kociubinski GL, Ferreira CL. Aislamiento y caracterización in vitro de cepas de Lactobacillus ssp. como candidato a probióticas. Rev. Salud Anim. 2011; 33(3):154-160.
12. Mathur S, Singh R. Antibiotic resistance in food lactic acid bacteria – a review. Intern. J. Food Microbiol. 2005; 105(3):281-295.
13. Cabrera CE, Gómez RF, Zúñiga AE. La resistencia de bacterias a antibióticos, antisépticos y desinfectantes una manifestación de los mecanismos de supervivencia y adaptación. Colombia Médica 2007; 38(2):149-158.
14. Junod T, López-Martín J, Gädicke P. Estudio de susceptibilidad antimicrobiana de Salmonella enterica en muestras de origen animal y alimentario. Rev. Med. Chile. 2013; 141:298-304.
15. Rajaram G, Manivasagan P, Gunasekaran U, Ramesh S, Ashokkumar S, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Isolation, identification and characterization of bacteriocin from Lactobacillus lactis and its antimicrobial and cytotoxic properties. African Journal of Pharmacy and Pharmacology 2010; 4(12):895-902.
16. Dimov S, Ivanova P, Harizanova N. Genetics of bacteriocins biosynthesis by lactic acid bacteria. Biotechnology & Biotechnological Equipment 2005; 19(Supl 2):4-10.
17. Eggimann B, Bachmann M. Purification and Partial characterization of an aminopeptidase from Lactobacillus lactis. Applied and Environmental Microbiology 1980; 40(5):876-882.
18. Lade H, Chitannad M, Gyananath G, Kadam T. Studies On Some Properties of Bacteriocins Produced by Lactobacillus Species Isolated from Agro-Based Waste. The Intern. J. Microbiol. 2006; 2(1):1-4.
19. Crueger W, Crueger A. Biotecnología: Manual de Microbiología Industrial. 3 ed. España: Ed. Acribia; 1993.
20. Dahl T, Midden W, Hartman P. Killing of Gram-negative and Gram-positive Bacteria by Pure Singlet Oxygen. J Bacteriol 1989; 171(4):2188-2194.
21. Cai Y, Suyanandana P, Saman P, Benno Y. 1999. Classification and characterization of lactic acid bacteria isolated from the intestines of common carp and freshwater prawns. J Gen Appl Microbiol 1999; 45(4):177-184.
22. Bauer A, Kirby J, Sherris T. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am. J. Clin. Pathol. 1966; 36:493-496.
23. Tagg J, McGiven A. 1971. Assay system for Bacteriocins. Appl. Environ. Microb. 1971; 21(5):943.
24. Jurado-Gámez H, Calpa-Yama F, Chaspuengal-Tulcán A. Determinación in vitro de la acción probiótica de Lactobacillus plantarum sobre Yersinia pseudotuberculosis aislada de Cavia porcellus. Rev. Fac. Med. Vet. Zoot. 2014; 61(3):241-257.
25. Ramírez M. Actividad inhibitoria de cepas de bacterias acido lácticas frente a bacterias patógenas y deterioradoras de alimentos [tesis]. Pachuca de Soto, México: Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo; 2005.
26. LANARA, Laboratorio de Referencia Animal. Métodos analíticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus ingredientes. Ii- Métodos físico e químicos. Mel. Ministério da Agricultura. Brasilia. 1981; 2(25):1-15.
27. Dubois M, Gilles K, Hamilton J, Rebers P, Smith F. Colorimetric method for determination of sugar and related substances. Anal Chem 1956; 28:350-356.
28. Negri L. El pH y la acidez de la leche; 2005. Disponible en: http://www.aprocal.com.ar/wp-content/ uploads/pH-y-acidez-en-leche2.pdf [consultado 2 de diciembre de 2013].
29. Lowry O, Rosebroug N, Far A, Randall R. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951; 193:265-75.
30. Rodríguez-León JA, Bueno G, Rodríguez DE, Delgado G, Serrano P, Brizuela MA. True and apparent yields and maintenance coefficient and their significance on fermentation kinetics. En: S. Roussos et al. (Eds.). New Horizons Biotechnology. Kluwer Academic Publishers; 2003. p. 163-172.
31. SAS Institute Inc. SAS/STAT® 9.1 User’s Guide. Cary, NC: SAS Institute Inc.; 2004.
32. Kumar R, Grover S, Kumar-Batish V. Hypocholesterolaemic effect of dietary inclusion of two putative probiotic bile salt hydrolase-producing Lactobacillus plantarum strains in Sprague-Dawley rats. British Journal of Nutrition 2011; 105:561-573.
33. Hamon E, Horvatovich P, Izquierdo E, Bringel F, Marchioni E, Aoudé-Werner D, Ennahar S. Comparative proteomic analysis of Lactobacillus plantarum for the identification of key proteins in bile tolerance. BMC Microbiology 2011; 11:63.
34. Wu R, Sun Z, Wu J, Meng H, Zhang H. Effect of bile salts stress on protein synthesis of Lactobacillus casei Zhang revealed by 2 –dimensional gel electrophoresis. J. Dairy Sci. 2010; 93:3858-3868.
35. Adebayo-Tayo B, Onilude A. Screening of Lactic Acid Bacteria Strains Isotated from Some Nigerian Fermented Food for EPS production. World Applied Science Journal 2008; 4(5):741-747.
36. Teijón-Rivera JM, Garrido-Pertierra A, Blanco-Gaitán D, Villaverde-Gutiérrez C, Mendoza-Oltras C, Ramírez-Rodrigo J. Fundamentos de bioquímica metabólica. Segunda edición. Madrid: Editorial TÉBAR, S.L.; 2006.
37. Kandler O, Weiss N. Regular, Nosporing Gram-positive Rods. En: Sneath PH, Mair NS, Sharpe ME, Holt JG (Eds.). Bergey’s manual of systematic bacteriology. Vol. 2. Baltimore (USA): Williams & Wilkins; 1986. p. 1208-1235.
38. Piard J, Desmazeaud M. Inhibiting factors produced by lactic acid bacteria. Oxygen metabolites and catabolism end-products. Lait 1991; 71:525-541.
39. Broadbent J, Larsen R, Deibel V, Steele J. Physiological and Transcriptional Response of Lactobacillus casei ATCC 334 to Acid Stress. J. Bacteriol. 2010; 192(9):2445-2458.
40. Tambecar D, Buhutada S. Studies on Antimicrobial Activity and Characteristic of Bacteriocins produced by Lactobacillus Strains Isolated from Milk of Domestic Animals. The Internet Journal of Microbiology 2008; 8(2).
41. Sankar N, Priyanka D, Reddy P, Rajanikanth P, Kumar K, Indira M. Purification and Characterization of Bacteriocin Produced by Lactobacillus plantarum Isolated from Cow Milk. Inter. J. Microbiol. Res. 2012; 3(2):133-137.
42. Rajaram G, Manivasagan P, Thilagavathi B, Saravanakumar A. Purification and Characterization of a Bacteriocin Produced by Lactobacillus lactis Isolated from Marine Environment. Advance Journal of Food Science and Technology 2010; 2(2):138-144.
43. Allende A, Martínez B, Selma V, Gil M, Suárez J, Rodríguez A. Growth and bacteriocin production by lactic acid bacteria in vegetable broth and their effectiveness at reducing Listeria monocytogenes in vitro and in fresh-cut lettuce. J. Food Mocrobiol. 2007; 1-8.
44. Qin J, Zhao B, Wang X, Wang X, Wang L, Yu B, et al. Non-Sterilized Fermentative Production of Polymer-Grade L-Lactic Acid by a Newly Isolated Thermophilic Strain Bacillus sp. 2-6. Plos One 2009; 4(2):e4359.
45. Batdorj B, Trinetta V, Dalgalarrondo M, Prévost H, Dousset X, Ivanova I, et al. Isolation, taxonomic identification and hydrogen peroxide production by Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis T31, isolated from Mongolian yoghurt: inhibitory activity on food-borne pathogens. J. Appl. Microbiol. 2007; 103:584-593.
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