Diagnóstico de la Leishmaniasis Visceral Canina mediante las técnicas Western Blot e Inmunofluorescencia Indirecta.

Resumen

Objetivo: un estudio epidemiológico transversal fue desarrollado para establecer la seroprevalencia de la Leishmaniasis Visceral (LV) en caninos localizados en la zona endémica del departamento del Tolima por medio de las pruebas de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) y Western Blot (WB). Materiales y métodos: se incluyeron en el estudio 211 caninos mestizos procedentes de seis municipios de la zona endémica de leishmaniasis visceral del departamento del Tolima. Se utilizó como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum MHOM/COL/CL044B para IFI y WB. Resultados: se estableció una seroprevalencia de la Leishmaniasis Visceral Canina en el grupo de animales evaluados del 41,7 y 22,2% por medio de IFI y WB, respectivamente. La concordancia entre las dos técnicas fue negativa (k = -0,102; p = 0,084). Se detectaron 12 fracciones antigénicas en la prueba WB entre los 13 y 91 kDa, de las cuales la de 14 kDa se considera valiosa en el diagnóstico precoz de la infección, para evaluar la resolución de la enfermedad y la evolución del tratamiento. Se sugiere desarrollar un constructo de pruebas diagnósticas directas e indirectas que permitan confirmar el estado real de la infección de los caninos, para orientar eficientemente los programas de control de la enfermedad en zonas endémicas de leishmaniasis visceral.

Palabras clave:

Leishmaniasis Visceral (LV)

western blot

infección natural

control

Visceral leishmaniasis (VL)

western blot

natural infection

control

Leishmaniose Visceral (LV)

western blot

infecção natural

controle

Citas

Alves WA, Bevilacqua PD. Quality of diagnosis of canine visceral Leishmaniasis in epidemiological surveys: an epidemic in Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, 1993-1997. Cad. Saude Pública 2004;20(1):259-265.

Ferroglio, F, Centaro E, Mignone W, Trisciuoglio A. Evaluation o fan ELISA rapid device for the serological diagnosis of Leishmania infantum infection in dog as compared with immunofluorescence assay and Western blot. Vet. Parasitol. 2007;144:162-166.

Aoun O, Mary Ch, Roquedplo C, Marié JL, Terrier O, Levieuge A, et al. Canine leishmaniasis in Routh-east of France: Screening of Leishmania infantum antibodies (western blotting, ELISA) and parasitaemia levels by PCR quintification. Vet. Parasitol. 2009;166:27-31.

Corredor A, Álvarez CA, Agudelo CA, Bueno M, López MC, Cáceres E, et al. Prevalence of Trypanosoma cruzi and Leishmania chagasi infection and risk factors in a Colombian indigenous population. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 1999;41(4):229-234.

Travi B. Un enfoque integral al estudio de animales reservorios, con énfasis en las Leishmaniosis del Nuevo mundo. Med UIS 1998;12:311-315.

Ministerio de la Protección Social de Colombia. Guía de Atención de la Leishmaniasis 21; 2006.

Travi B, Tabares C, Cadena H, Ferro C, Osorio Y. Canine Visceral Leishmaniasis in Colombia: relationship between clinical and parasitologic status and infectivity for sand flies. Am. J. Trop. Med. Hyg. 2001;64(3,4):119-124.

Fernández J, Charry T, Bello F, Escobar J, Lozano C, Ayala M, et al. Prevalencia de Leishmaniosis Visceral canina en municipios de Huila Colombia. Rev. Salud Pública 2002;4(3):278-85.

Mettler M, Grimm F, Capelli G, Camp H, Deplazes P. Evaluation of Enzyme-Linked Immunosorbent assays, an Immunofluorescent-antibody test, and two rapid tests (Immunochromatographic-Dipstick and gel tests) for serological diagnosis of symptomatic and asymptomatic Leishmania infections in dogs. J Clin Microbiol 2005;43(11):5515-157.

De Paula A, Da Silva A, Fernandes O, Jansen A. The use of immunoblot analysis in the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in an endemic area of Rio de Janeiro. J Parasitol 2009;89:832-836.

Riera C, Valladares JE, Gallego M, Aisa M, Castillejo S, Fisa R, et al. Serological and parasitological follow-up in dogs experimentally infected with Leishmania infantum and treated with meglumine antimoniate. Vet. Parasitol. 1999;84:33-47.

Vargas-Duarte JJ, López-Páez MC, Escovar-Castro JE, Fernández-Manrique J. Evaluación por western blot, inmunofluorescencia indirecta y ELISA de perros infectados con Leishmania (Leishmania) infantum. Rev. Salud Pública 2009;11(4):641-652.

Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970;227:680-685.

Towbin H, Staehelin T, Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets: procedures and some applications. Proc Natl Acad Sci USA 1979;76:4350-4354.

Congreso de la República de Colombia. Ley 084 de 1989. Estatuto Nacional de Protección de los animales. Diario Oficial, Año CXXVI. N.3912027; 1989. p. 1-14.

Ministerio de Salud, República de Colombia. Resolución No. 008430 de 1993. Investigación en Salud; 1993. p. 1-20.

Fernández J, Bello F, López MC, Moncada LI, Vargas JJ, Ayala MS, et al. Seroprevalencia de leishmaniosis visceral canina en la comuna 8 de Neiva y en cuatro municipios de Huila, Colombia. Biomédica 2006;26(Supl.1):121-30.

Iniesta L, Fernández-Barredo S, Bulle B, Gómez M, Piarrous R, Gallego M, et al. Diagnostic techiniques to detect cryptic leishmaniasis in dogs. Clin Diagn Lab Immnunol 2002;9:1137-1141.

Lasri S, Sahibi H, Natami A, Rhalem A. Western blot analysis of Leishmania infantum antigens using sera from pentamidine-treated dogs. Vet Immunol Immunopathol 2003;91:13-18.

Aisa M, Castillejo S, Gallego M, Fisa R, Riera M, Colmenares M, et al. Diagnostic potential of western blot analysis of sera from dogs with leihsmaniasis in endemic areas and significance of the pattern. Am J Trop Med Hug 1998;58:154-159.

Mary C, Lamouroux D, Dunan S, Quillci M. Western blot analysis of antibodies to Leishmania infantum antigens: potential of the 14-Kd and 16-Kd antigens for diagnosis and epidemiological purposes. Am J Trop Med Hyg 1992;47:764-771.